By immunoelectrophoresis and ELISA this antibody reacts specifically with Chicken IgY and with light chains common to other Chicken immunoglobulins. No antibody was detected against non immunoglobulin serum proteins. 纯化说明 This antibody was isolated by affinity chromatography using antigen coupled to agarose beads and conjugated to Horse Radish Peroxidase (HRP). The Abpromise guarantee Abpromise™承诺保证使用ab97135于以下的经测试应用 \"应用说明”部分 下显示的仅为推荐的起始稀释度；实际最佳的稀释度/浓度应由使用者检定。 WB1/2000 - 1/20000. Colorimetric: 1/5000 - 1/30000; Chemiluminescent: 1/10000 - 1/50000All lanes : Anti-beta Actin antibody - Loading Control (ab13822) at 1 g/mlLanes 1-6 : HeLa (Human epithelial carcinoma cell line) Whole Cell LysateLysates/proteins at 10 g per lane.SecondaryLanes 1 - 2 : Goat polyclonal Secondary Antibody to Chicken IgY - H&L (HRP) (ab97135) at 1/2000 dilutionLanes 3 - 4 : Goat polyclonal Secondary Antibody to Chicken IgY - H&L (HRP) (ab97135) at 1/10000 dilutionLanes 5 - 6 : Goat polyclonal Secondary Antibody to Chicken IgY - H&L (HRP) (ab97135) at 1/20000 dilutionDeveloped using the ECL technique.Performed under reducing conditions.Exposure time : 90 seconds All lanes : Anti-Vimentin antibody (ab24525)All lanes : Mouse cardiac fibroblastsLysates/proteins at 4 µg per lane.SecondaryAll lanes : Goat Anti-Chicken IgY H&L (HRP) (ab97135) at 1/2500 dilutionDeveloped using the ECL technique.Performed under reducing conditions.Exposure time: 2 secondsSee AbreviewAb97135 used to detect a chicken anti-beta Galactosidase antibody (ab9361). Ab97135 used at a concentration of 1:2000 in 5% milk blocking buffer in 0.1% Tween, 1x PBS. Whole lysates from DH5a (E.coli). Specific band at approx. 110 KDa. Non-specific bands: 70 Kda. NB. Gels run on 10% Acrylamide gels.This image is courtesy of an anonymous Abreview. To our knowledge, customised protocols are not required for this product. Please try the standard protocols listed below and let us know how you get on. Click here to view the general protocols 发表研究结果有使用 ab97135？请让我们知道，以便我们可以引用本数据表中的参考文章。 ab97135 被引用在 22 文献中. Uematsu K et al. Osteoclastogenic Potential of Tissue-Engineered Periosteal Sheet: Effects of Culture Media on the Ability to Recruit Osteoclast Precursors. Int J Mol Sci 22:N/A (2021).PubMed: 33671612 Mason B et al. Fbxl17 is rearranged in breast cancer and loss of its activity leads to increased global O-GlcNAcylation. Cell Mol Life Sci 77:2605-2620 (2020).PubMed: 31560077 Taglialegna A et al. The biofilm-associated surface protein Esp of Enterococcus faecalis forms amyloid-like fibers. NPJ Biofilms Microbiomes 6:15 (2020).PubMed: 32221298 Wu Z et al. MISTERMINATE Mechanistically Links Mitochondrial Dysfunction with Proteostasis Failure. Mol Cell 75:835-848.e8 (2019).PubMed: 31378462 Costa RO et al. Synaptogenesis Stimulates a Proteasome-Mediated Ribosome Reduction in Axons. Cell Rep 28:864-876.e6 (2019).PubMed: 31340150 View all Publications for this product We followed the protocol published by Meunier et al. PLOS One 2017, after confirming with customer service that the concentration as published is the same for our lot number. The feed-back was fast and useful, and the ELISA results look good. We continue to use the product in our following ELISAs and are satisfied with the ease of use and the variability of the results. Antibody was diluted 1/2000 in TBST and incubated 1h at RTDetection performed using ECL+Primary antibody used was ab13989. Hello! The reply from the lab is below, please let me know if you have any further questions!Two responses: The first is that the client should NOT use PVDF or any other nylon-based membranes. Chicken antibodies bind non-specifically to PVDF. Instead, they should use nitrocellulose membranes. Many folks aren\'t aware of this issue.The second response is that there should be not cross-reactivity to anything in Saccharomyces or any other type of yeast. There are no yeast gene products that I am aware of that are similar to GFP. With that said, the yeast cell wall is tricky, and some things bind to it non-specifically (i.e., via ionic bonds with low affinity). Theoretically, these non-specific interactions can be abrogated with high salt. So, if the client is having trouble with higher-than-normal backgrounds (using nitrocellulose), then they should try making the total salt concentration 1.0 M in the primary antibody preparation. Read More Vielen Dank f r Ihre Antwort.Es tut mir leid, dass Sie Probleme mit diesem Antik rper hatten. Wie besprochen, habe ich eine kostenlose Ersatzlieferung des ab97135 f r Sie in Auftrag gegeben. Sie hat die Referenznummer 1212315 und sollte am 30/11/12 bei Ihnen ankommen.Ich w nsche Ihnen viel Erfolg f r Ihr Projekt. Bitte z gern Sie nicht, sich wieder bei uns zu melden wenn Sie weiterhin Probleme bei der Detektion haben und ich werde wie besprochen ein Austauschprodukt f r den prim ren Antik rper veranlassen. Read More Vielen dank f r Ihre Antwort.In diesem Fall w rde ich Ihnen gerne anbieten nach dem Ausschlussverfahren vorzugehen, wenn Sie damit einverstanden sind.Ich w rde Ihnen gerne ein kostenloses Ersatzprodukt f r den sekund ren Antik rper zusenden. Wenn Sie diesen f r das Experiment verwenden und sie weiterhin kein positives Ergebnis erhalten w rde ich im Anschluss gerne den prim ren Antik rper austauschen.Es w re hilfreich, wenn Sie in das n chste Experiment auch eine Kontrolle f r das verwendete Kit mit einschlie en k nnten, um dieses auf die korrekte Funktionsweise hin zu berpr fen.Bitte lassen Sie mich wissen was Sie von diesem Vorschlag halten. Sobald ich Ihre R ckmeldung erhalte werde ich die kostenlose Lieferung des Ersatzproduktes f r den sekund ren Antik rper gerne in Auftrag geben. Read More Vielen Dank f r die Email und die Zusendung des ausgef llten Fragebogens. Anja ist leider au er Haus. Wenn es Ihnen recht ist w rde ich mich gerne in dieser Zeit um Ihren Fall k mmern.Es tut mir Leid, dass sie Probleme mit unseren Produkten haben. Ich m chte Ihnen noch einmal versichern, dass der ab9361 garantiert ist f r die ICH-Fr in Maus und damit unter unsere 6 Monatige Garantie f llt, wenn er nicht funktioniert wie auf dem Datenblatt beschrieben.Leider gibt es nicht viele Ver nderungen die ich zu Ihrem Protokoll vorschlagen kann. Um Ihnen zu helfen mehr Informationen zu erhalten und um zu berpr fung, welcher der beiden Antik rper nicht funktioniert, moechte ich folgende Vorschl ge machen.1. Es w re wichtig den zweiten Antik rper mit einem anderen prim ren Antik rper in einem Versuch zu verwenden, um dessen Funktionalit t zu best tigen.2. K nnten Sie mir bitte genauerer Angaben ber die verwendete positiv Kontrolle machen? Welches Gewebe wurde genau getestet?3. K nnten Sie mir bitte genauere Angaben ber das TSA Kit zukommen lassen. Die Herstellerangaben und eine Produktnummer w ren hilfreich, so dass ich mir das Kit genauer anschauen kann.4. Das von uns empfohlene Protokoll f r die F rbung lautet wie folgt:Day 11. (If using an HRP conjugate for detection, blocking of endogenous peroxidase can be performed here butwe recommend waiting until after the primary antibody incubation. See Day 2, step 2 and note v.).2. Wash the slides 2 x 5 minutes in TBS plus 0.025% Triton X-100 with gentle agitation. (See note i).3. Block in 10% normal serum with 1% BSA in TBS for 2 hours at room temperature (See note iii).4. Drain slides for a few seconds (do not rinse) and wipe around the sections with tissue paper (See note iv).5. Apply primary antibody diluted in TBS with 1% BSA (See note v).6. Incubate overnight at 4 C (See note iv).Day 21. Rinse 2 x 5min TBS 0.025% Triton with gentle agitation.2. If using an HRP conjugate for detection, incubate the slides in 0.3% H2O2 in TBS for 15 min (See note v.).3. For enzymatic detection (HRP or AP secondary conjugates):Apply enzyme-conjugated secondary antibody to the slide diluted to the concentration recommended bythe manufacturer in TBS with 1% BSA, and incubate for 1 hour at room temperature.For fluorescent detection:4. Rinse 3 x 5min TBS.If using fluorescent detection, end at this step and coverslip with mounting medium.If visualizing the protein with a chromogen, continue with the following steps.5. Develop with chromogen for 10 min at room temperature (See note vi.).6. Rinse in running tap water for 5 min.7. Counterstain (if required) (See note vii.).8. Dehydrate, clear and mount (See notes ix. and x.).Bitte z gern Sie nicht mit den zus tzlichen Informationen auf mich zur ck zu kommen. Der vermutlich wichtigste erste Schritt ist zu berpr fen welcher der beiden Antik rper nicht funktioniert.Ich hoffe ich konnte Ihnen etwas weiter helfen und freue mich auf Ihre Antwort. Read MorePlease note: All products are FOR RESEARCH USE ONLY. NOT FOR USE IN DIAGNOSTIC PROCEDURES For licensing inquiries, please contact partnerships@abcam.com

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