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商品描述
GenHunter提供了几种产品为北&反向Northern杂交: -所述HotPrime DNA标记试剂盒用于与放射性标记的dATP差异显示片段的优化标记(目录号H501)。 - 用于标记用于“反向Northern”印迹的cDNA探针的ReversePrime cDNA标记试剂盒(目录号R701)。HotPrime DNA标记试剂盒在传统的“随机引物”方法上进行了三项独特的改进,可以对DNA探针进行至少5至10倍的比放射性进行放射性标记。它旨在有效标记从差异展示中分离的cDNA探针,用于Northern或Southern印迹分析以及文库筛选。但是,HotPrime试剂盒还可以将DNA探针标记为具有类似高比活性的任何其他应用。对传统随机引物试剂盒的第一个改进涉及使用随机十聚体而不是六聚体。基于观察到短于9个碱基的引物在启动DNA合成中无效的观察,这确保了任何序列的DNA探针的更有效的引发(Williams等,1991,Nucleic Acids Res。,18:6531-6535)。第二,由于差异显示的cDNA片段相对较短(150-700 bp),因此将锚定的oligo-dT引物掺入标记缓冲液中可确保“全长”反义cDNA探针被标记,从而大大增加了Northern blot或文库筛选的信号检测。第三,利用放射性dATP代替dCTP,可以利用差异显示检测到的mRNA 3'非翻译区的AT富集性质,从而将DNA标记为最高的比活。这大大增加了在RNA印迹或文库筛选中进行信号检测的机会。第三,利用放射性dATP代替dCTP,可以利用差异显示检测到的mRNA的3'非翻译区的AT富集性质,将DNA标记为最高的比活。这大大增加了在RNA印迹或文库筛选中进行信号检测的机会。第三,利用放射性dATP代替dCTP,可以利用差异显示检测到的mRNA 3'非翻译区的AT富集性质,从而将DNA标记为最高的比活。GenHunter的ReversePrime试剂盒提供了标记cDNA的完整系统,可用于“反向Northern”印迹,对差异显示产生的阳性克隆进行差异筛选。该试剂盒适用于斑点印迹或菌落杂交筛选克隆到PCR-TRAP®克隆系统(货号P404)中的差异显示PCR产物。这种改进显着减少了通过Northern印迹或核糖核酸酶保护试验进行筛查所需的劳动量,并提供了高特异性。它可以准确地从假阳性中识别出阳性,并减少进行差异显示筛选所需的RNA量。


