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제품특징
□ 제품설명
본 제품은 Mycoplasma 16S rRNA 유전자를 타겟으로 Real Time PCR 장치를 이용해대부분의 Mycoplasma를 특이적으로 검출하기 위한 kit이다. 적어도 Mycoplasma 속 중의 10종(M. arginini, M. hominis, M. hyorhinis, M. orale, M. salivarium, M. fermentas, M. bovis, M. arthritidis, M. pirum, M. pneumoniae) 및 Acholeplasma속 중의 1종(A. laidlawii)에 대해 매우 민감하게 검출할 수 있음을 확인하였다. 본 kit의 증폭 반응에는 Hot Start PCR용 효소인 TaKaRa Ex Taq HS를 사용하고 있어 반응액 조제 혹은 반응(본격적인 cycle 반응)전에 miss-priming이나 primer dimer에서 유래하는 비특이적 증폭을 막을 수 있다. 증폭 산물의 검출에는 cycling probe법을 사용하고 있다. 이 방법은 RNA와 DNA로 구성된 키메라probe(chimera probe)와 RNase H와의 조합에 의한 고감도 검출 방법으로, 매우 특이성이 높은 검출이 가능하다. Probe는 한쪽 말단은 형광 물질로, 다른 말단은 그 형광 물질이 발하는 형광을 소광하는 물질(quencher)로 표지되어 있다. 이 cycling probe는 intact한 상태에서는 quenching에 의해 형광을 발할 수 없지만, 상보적인 증폭 산물과 하이브리드를 형성한 후에 RNase H에 의해 RNA 부분에서 절단되면, 강한 형광을 발하게 된다. 이러한 방법으로 형광 강도를 측정하여 증폭 산물량을 모니터 할 수 있다. 본 kit의 probe는 Mycoplasma에 특징적인 염기에 상보적으로 결합 하는 염기 부분을 RNA로 하고 있기 때문에, Mycoplasma만을 특이적으로 고감도에 검출하는 것이 가능하다.
□ 내용
1. 2×CycleavePCR Reaction Mix | 625 μl |
2. Myco. Primer/Probe Mix(5×conc.) | 250 μl *1 |
3. RNase Free dH2O | 1 ml |
4. Myco. Positive Control(1×106 copies/μl) | 20 μl *2 |
5. Proteinase k | 50 μl |
*1 형광 표지 probe를 포함하고 있으므로 차광에 유의한다. *2 Real time PCR component (1~3)에 잘못해 혼입하면 올바른 검출 반응을 실시할 수 없게 된다. 별도의 보관케이스를 마련하여 따로 보존한다.
