Taq-KlenowismodifiedfromfulllengthTaqDNApolymerasebytruncatingitsN-terminus,withamolecularweightof61kDa.
Description:
Taq-KlenowismodifiedfromfulllengthTaq-KlenowbytruncatingitsN-terminus,withamolecularweightof61kDa.ComparedwithregularTaq-Klenow,thistruncatedversionisdeficientin5'->3'exonucleaseactivity,butismoreThermostableandhashigherfidelityinPCRamplification.
Application:
-PCR(ordinaryandhigh-throughput)
-PrimerExtension
-MicroarrayAnalysis
-Denaturinghighperformanceliquidchromatography(DHPLC)
Source:
ArecombinantE.colistraincarryingtheTaq-KlenowgenefromthethermophilicorganismThermusAquaticusYT-1.
Suppliedwith:
10xTaqPCRBuffer(nodNTP)
Suppliedin:
20mMTris-HCl
100mMNaCl
1.0mMDTT
0.1mMEDTA
StABIlizer
50%Glycerol
pH7.5@25°C
UnitDefinition:
1unitisdefinedastheamountofenzymethatwillincorporate10nmolofdNTPsintoacid-insolublematerialin30minutesat75°C.
PCRGuidelines:
Taq-KlenowistheoriginalandmostcommonlyusedPCRenzyme.Taqexcelsatamplifyingshorter(<5kb)sequencesfromlow-complexitytemplatesourcesandproducesrobustyieldswithlittleornooptimizationofreactionconditions.ConsiderthefollowingguidelineswhendesigningPCRstrategiesusingTaqDSC2.0DNAPolymerase.
1.DNATemplate:AlthoughextensivepurificationofPCRtemplatesistypicallynotnecessary,careshouldbetakenwithcrudeorpartiallypurifiedDNAsourcesashandlingandchemicalagentscanadverselyaffectthePCRprocess.Exposuretoshort-waveUVlightorotherDNAdamagingagentsshouldbeavoided,asshouldhighionicstrength,detergentssuchasSDS,loADIngdyesandphenol.InordertopreventcontaminationfrompreviousPCRreactions,considersettingupreactionsinapositive-pressurehoodandwithaerosolbarrierpipettips.Inatypical25cyclePCR,104copiesoftargetsequencewillyieldreproducIBLeamplificationproduct.Thiscorrespondstoroughly0.1-1ng/ml(finalconcentration)ofplasmidDNA,and1-10µg/mlofgenomicDNA.TheuseoflowerDNAconcentrationstypicallyproduceslessnon-specificproduct,whilehigherconcentrationscanallowforfewercyclesandlowermutationrates.
2.PrimerDesign:Ideally,oligonucleotideprimersare15-30basesinlength,nearly50%G+C,andhaveequal(+/-3°C)annealingtemperatures.Theuseofsoftwaretodetectself-complementaryorhairpin-proneregionsisadvisedandisofferedasaservicebysomesynthesisproviders.Notethatalthoughthe5'-terminusoftheprimermaycontainuntemplatedsequence,the3'endmustmatchperfectly.Typicaloligonucleotideconcentrationinthereactionis0.1-0.5µM.
3.Magnesium:MagnesiumisacriticalcomponentofthePCRreactionthoughitsconcentrationcanbemodulatedtopromotevariouseffects.Generally,1.5-2.0mMMg2+istargeted,buthigherconcentrations(upto5mM)maybeusedtostimulatetheyieldofreactionsattheexpenseoffidelity.Theconverseisalsotrue-lowermagnesiumconcentrationswillpromotehigher-fidelityproductswithaloweroverallamplificationyield.Notethatcertainreactioncomponents,inparticulartemplateDNAandoligonucleotides,maycontributechelatingagentstothereactionwhichcouldlowertheeffectivemagnesiumconcentrationandstarvethereaction.
4.dNTPs:Generally,afinalconcentrationof100-200µMdNTPsisemployed,thoughhigherconcentrationsmaystimulateyields(particularlywithlongertargets)andlowermayofferincreasesinfidelity.TaqDSC2.0DNAPolymerasecanalsoincorporateandreadthroughdeoxyUridineandInosine,twoanalogsusedincertainapplications.
5.TaqDSC2.0Polymerase:1unit/50µLreaction(20U/mL)istypical,thoughadditionalenzymemaybeaddedtostimulateyields.TaqDSC2.0DNAPolymeraseextendsaDNAtemplateatapproximately1-2000nucleotides/minute,soitisrecommendedthat30-60secondsofextensiontimeshouldbeprovidedperkb,percycle.Appropriateextensiontemperaturesrangefrom68-72°C.BecauseTaqDSC2.0DNAPolymeraseexploitsthenaturalaffinityofaDNApolymeraseforaduplexDNAfragmenttopromoteitshot-startfunction,itdoesnotrequireanextensiveinitialdenaturationsteptoactivatethepolymerase.
Typical50µlReaction:
Onice,prepareeachofthefollowingmastermixes,combine,andplaceinheated(to94°C)thermalcycler:
2xDNA/OligonucleotideMasterMix:
1.0µl10mMdNTPs
1.0µl10µMForwardPrimer
1.0µl10µMReversePrimer
1.0µl500ng/µlgenomicDNA
21µlTypeIWater
2xEnzyme/BufferMasterMix:
5.0µl10xTaqPCRBuffer (nodNTP)
0.2µl5U/µlTaqDSC2.0DNAPolymerase
19.8µlTypeIWater
RecommendedStorageCondition:-20°C |
Molecular Cloning Laboratories（MCLAB）成立于1998年，是为生命科学界提供基因组研究耗材和服务的先进者。
MCLAB提供具有成本效益的消耗品和试剂，专注于代以及新一代测序和DNA片段分析。我们提供大量分子生物学相关产品，包括抗体，生化试剂，克隆试剂盒，酶，PCR试剂盒，蛋白质凝胶和溶液等。作为我们自己的制造商，我们可以控制生产流程，并大限度地减少定制和大规模订单的延迟。它有助于确保我们的客户获得高质量和价值。
MCLAB拥有一支由20 多位经验丰富的科学家组成的团队，致力于为研究人员提供的服务。我们专注于基因组学领域，拥有DNA测序，发酵，片段分析，分子克隆，过表达，蛋白质纯化和蛋白质合成方面的专家。我们采用量身定制的客户服务方式，让您有机会定制您的项目，并直接与我们的科学家团队交流以获得技术支持。凭借二十多年的经验，我们才华横溢，技术的员工致力于为您提供所需的成果。
10 x PBS（磷酸盐缓冲盐水）
磷酸盐缓冲盐水（PBS）是一种平衡盐溶液，用于各种细胞培养应用，例如在解离前洗涤细胞，运输细胞或组织样品，稀释细胞用于计数和制备试剂。PBS配制成不含钙和镁，用于在细胞解离前从培养物中冲洗螯合剂。
名称
货号
描述
10 x PBS（磷酸盐缓冲盐水）
PBS10-100
500毫升
10 x PBS（磷酸盐缓冲盐水）
PBS10-200
1升
10 x PBS（磷酸盐缓冲盐水）
PBS10-OEM
OEM
描述：
磷酸盐缓冲盐水（PBS）是一种平衡盐溶液，用于各种细胞培养应用，如解离前洗涤细胞，运输细胞或组织样品，稀释细胞进行计数，以及制备试剂。PBS配制成不含钙和镁，用于在细胞解离前从培养物中冲洗螯合剂。
应用：
浓缩的标准磷酸盐缓冲溶液。
pH范围： 7.3 - 7.5
推荐储存条件：室温
部分产品：
名称
货号
尺寸
浓度
大肠杆菌DNA连接酶
EDLA-100
1,000个单位
10,000 U / ml
大肠杆菌DNA连接酶
EDLA-200
5,000个单位
10,000 U / ml
大肠杆菌DNA连接酶
EDLA-OEM
任何尺寸
APE 1
APE-100
3,750 units
15,000 U/ml
APE 1
APE-200
15,000 units
15,000 U/ml
APE 1
APE-OEM
Any Size
名称
货号
描述
I-5™2X高保真混色
I5HM-100
100次反应（50μl体积）
I-5™2X高保真混色
I5HM-200
500次反应（50μl体积）
I-5™2X高保真混色
I5HM-5000
5,000次反应（50μl体积）
I-5™2X高保真混色
I5HM-25K
25,000次反应（50μl体积）
I-5™2X高保真混色
I5HM-OEM
OEM
名称
货号
描述
2x BlueStar™PCR Master Mix
BSPM-100
100次反应（50μl体积）
2x BlueStar™PCR Master Mix
BSPM-200
1,000次反应（50μl体积）
上海起发实验试剂有限公司是实验试剂一站式采购服务商
1：强大的进口辐射能力，血清、抗体、耗材、大部分限制进口品等。
2：产品种类齐全，经营超过700多个品牌，基本涵盖所有生物实验试剂耗材。
3：提供加急服务，货品一般1-2周到货。
4：富有竞争力的价格优势，绝大部分价格有优势。
5：多年积累良好的信誉，大部分客户提供货到付款服务。客户包括清华、北大、交大、复旦、中山等100多所高校，ROCHE，阿斯利康、国药、fisher等知名药企。
6：我们还是Santa,Advanced Biotechnologies Inc,Athens Research & Technology,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. FormuMax Scientific,Inc, Genebridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,omicronbio, Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,RESEARCH DIETS,INC,sterlitech；sysy,TriLink BioTechnologies,Inc；worthington-biochem,zyagen等几十家国外公司授权代理。
7：我们还是invitrogen,qiagen,MiraiBioam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等知名大品牌批发，欢迎合作。
.jpg)
