Pre-mademicroRNAexrepssionlentivirusforhumanhsa-miR-4284(MIMAT0016915):

The humanmicroRNA precursorsanditsnativecontextsequences(upstreamanddownstreamflankinggenomicsequences)wasclonedintoaGentarget’smiRNAexpressionlentivector: pLenti-TetCMV(GFP-3UTR/miRNA)-Rsv(Puro).ThemiRNAclonedat3’UTRorGFPMarkerunderanoptionalinducIBLeCMVpromoter. ItcanbeusedforconstitutivemiRexpressionorusedasinduciblemiRexpressionwhentheTetRrepressorisprescent.TheGFPsignalprovidesareal-timemonitorforthemiRNAexpressionlevelsandthelentivirustransductionefficiency.

TheclonedmiRNAexpressprecursorsequenceislistedbelow.Note: theRed-highlightedregionisthemiRStem-loopsequence: 

GTCTGGTCTCAAACTCTTGGGCTCAAGTGATCTTCCCACCTTGGCTTCCCAAAGTGCTGGGAGTATAGG 

TGTGAGCCGCCACCATGCCCGGCCTGAGCATGTTCTGTGAGGGGCTCACATCACCCCATCAAAGTGGGG 

ACTCATGGGGAGAGGGGGTAGTTAGGAGCTTTGATAGAGGCGGCTCAGAGGGGCCTCCTCTCTTTAAGA 

TATCGTACCACCTCCCCAGCAGCTAAAATAAATCCTCGTTCCCACTCCCCACCGAGTGCCTGGGGCTGT 

CACCA

ItguaranteestogeneratethematuredmiRNAsequenceasfollows:

gggcucacaucaccccau

See Producemanual fordetails.

Amounts: 

1)500ulof ready-to-usespecificmiRNAexpressionlentivirusinDMEM-mediumcontaining60ugpolybrene(10x).

2)500ulof ready-to-use Negative-controlmiRNAexpressionlentivirusinDMEM-mediumcontaining60ugpolybrene(10x).(Note:ThemiR-Control doesnottranscribeanymiRNAsequences,buthasthesamebackbonewithGFPmarker).

Virustiter: 1×10⁷ IFU/ml,

Shipping: overnightshipmentindry-icepackage.(Note:Thisproductispre-madeinstock,readytoshipviaovernightdry-icepackage)

CAT#:miR#1164

Gentarget定制的稳定细胞系在所需宿主细胞系中为所需靶标生成组成型或诱导型表达稳定细胞哺乳动物稳定细胞系的创建： GenTarget稳定的细胞系服务为您构建细胞系提供了一种非常经济高效的方法。使用我们专有的慢病毒载体，我们会将您的靶基因亚克隆到我们的慢病毒载体中，生成慢病毒颗粒，依次感染您所请求的细胞系，并选择能持续高水平表达您的基因的细胞克隆。对于可诱导表达的细胞系，我们将首先用表达TetR阻遏物的颗粒感染细胞以制成TetR稳定的细胞系，然后感染目标表达颗粒以产生四环素诱导的稳定细胞系。我们专有的suCMV启动子具有最强的表达效率，可为您的靶标提供极高的表达水平。我们独特的技术确保了快速的周转时间。在验证靶基因的整合后，细胞系作为低温保存的小瓶运输。我们将与您合作，确保细胞系符合您的要求，以便您获得最好的质量和最优惠的价格。 GenTarget稳定细胞系的服务程序： 构建包含您的基因和所需选择标记的慢病毒载体产生慢病毒转导您要求的细胞系选择稳定转导的高表达细胞通过基因组PCR验证基因整合通过Western Blot验证表达最高的克隆（如果适用）提供两个稳定细胞的低温小瓶以及最终报告 使用慢病毒产生稳定细胞的优势是什么？为了使细胞系稳定，必须将靶标整合到宿主细胞的基因组中以进行稳定的组成型表达。随机整合（例如通过转染）显示出取决于整合位点的广泛表达水平。另外，随机整合通常导致靶标和选择标记的独立整合，因此有必要大规模筛选选择的阳性克隆。通常少于百分之十的抗生素抗性克隆表达转基因。相反，慢病毒转导倾向于在高转录水平位点（热点）与完整的病毒基因组整合。嵌入基质附着区（MARs）序列的工程化慢病毒转移载体可以提供与位置无关的转基因表达。与传统的稳定细胞系构建相比，为什么要使用GenTarget的稳定细胞系服务？ 工程化的内部慢病毒载体可提供高效基因整合，假阳性率极低安全的，自灭活的，高滴度的慢病毒颗粒可以将您的基因传递到各种细胞系中，包括非分裂，原代或干细胞靶标蛋白的表达可以通过荧光成像进行追踪和监测，从而可以对整合的细胞进行分类或选择（荧光蛋白不会与靶标融合）。我们的专家在慢病毒克隆和表达方面拥有多年经验快速的周转时间最优惠的价格