2021-09-12【求助】关于基因敲除载体中的“splicing accepter”

请教各位前辈，在我的课题中要建基因敲除打靶载体，如下：

“长臂（末端具有SD序列）——loxP——SA——cassette1——polyA——loxP——SA——cassette2——polyA——短臂”

像这样具有两个SA序列的打靶载体，在转录的时候，长臂末端SD序列会从哪个SA开始继续转录？

有没有可能形成“长臂——cassette2”的转录本；即在转录时，跳过第一个SA，由第二个SA开始转录？如何避免？

刚涉及这个领域，望各位前辈多多指教。万分感激！